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技巧傳授:加熱法提取牛血清白蛋白方法
發(fā)布時(shí)間:2016/5/26 9:34:23 閱讀次數(shù):1733

        今天上海恒遠(yuǎn)為您分析整理出了一則關(guān)于加熱法提取牛血清蛋白方法的技巧傳授,下面就來看今天的重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容吧:
1. 牛血:取自綿陽近郊屠宰場(chǎng),以檸檬酸三鈉為抗凝劑,血液收羅后隨即疏散出血漿備用.
2. 試劑:【牛血清白蛋白】、溴甲酚氯購(gòu)自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司。
3. 白蛋白含量測(cè)定:接納溴甲酚氯法,以牛血潔白蛋白為尺度[4].1.5白蛋白純度的測(cè)定接納醋酸纖維素薄膜電泳法。
4. 吸光度值的測(cè)定:用分光光度計(jì)直接測(cè)定蛋白質(zhì)溶液在波長(zhǎng)為403nm處的光汲取值,然后折算成濃度為10g/L時(shí)牛血潔白蛋白的光汲取值,用A403表現(xiàn)。
5. 白蛋白的生產(chǎn)工藝:奇怪抗凝牛血用LC-6型大容量離心機(jī)(3000r/min×30min)離心疏散出血漿,加肯定量的蒸餾水稀釋,再參加恰當(dāng)?shù)姆(wěn)固劑和蛋白沉淀劑,然后按下述要領(lǐng)舉行實(shí)行處理懲罰:
 ① 差異pH值溶液對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響。在別的條件牢固的環(huán)境下,試驗(yàn)差異pH值對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
 ② 差異加熱保溫時(shí)間對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響。在選定的pH值和別的條件牢固的環(huán)境下,試驗(yàn)差異加熱保溫時(shí)間對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
 ③ 差異稀釋倍數(shù)對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響。在選定的pH值和保溫時(shí)間及別的條件牢固的環(huán)境下,試驗(yàn)差異稀釋倍數(shù)對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
 ④ 差異加熱溫度對(duì)白蛋白的收率和質(zhì)量的影響。在別的條件選定的環(huán)境下,試驗(yàn)差異加熱溫度對(duì)白蛋白的收率、純度及A403值的影響。
·【牛血清白蛋白】的用途有哪些?
  1. 用于生化研究、遺傳工程和醫(yī)藥研究
  2. 用作醫(yī)藥保健食品、調(diào)味品
  3. 維持滲透壓、pH緩沖、載體作用
  4. 在PCR體系中有助于Taq酶的穩(wěn)定性及活性,可以提高PCR的效率
·生產(chǎn)方法:以牛血為原料分離出血清,用硫酸銨分級(jí)沉淀后,經(jīng)辛酸處理精制而得。
·貯存方法
    每10克加100毫升水進(jìn)行溶解,或用 PBS溶解也可,視用途而決定。然后分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下20或30攝氏度的恒溫柜中,若使用防腐劑(如0.1%疊氮化鈉)則可貯存在零上4攝氏度的環(huán)境下。一般可存放數(shù)月不變質(zhì)。防腐劑可能對(duì)牛血清白蛋白的效果造成影響,應(yīng)慎用。
·購(gòu)上海恒遠(yuǎn)血清優(yōu)勢(shì)有哪些?
  1. 品質(zhì)有保證,三十年的血清生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)完全符合cGMP的生產(chǎn)要求,符合USDA標(biāo)準(zhǔn)。
  2. 種類齊全,可以滿足所有血清用戶的需求。
  3. 多種血清都提供了熱滅活的包裝,減少了實(shí)驗(yàn)室自行熱滅活的工作,并最大限度降低了熱滅活對(duì)血清的負(fù)面影響。
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