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恒遠(yuǎn)解析:樣本的采集及貯運(yùn)操作不當(dāng)會影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
發(fā)布時(shí)間:2016/7/13 9:33:42 閱讀次數(shù):1477

    ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn))以其靈敏度較高、特異性好的特點(diǎn)已廣泛用于科研實(shí)驗(yàn)及臨床,越來越多科研單位選擇用ELISA實(shí)驗(yàn)方法完成研究課題,所以,ELISA就有較大的科研前景。實(shí)驗(yàn)的第一步就是要準(zhǔn)備好樣本,樣本的收集跟保存聽上去貌似很簡單,但不乏有許多客戶是因?yàn)闃颖镜氖占4鏇]做好而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司作為專業(yè)的ELISA試劑盒廠家必須對影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果各因素有一定的認(rèn)識。才能全方位為客戶提供最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。優(yōu)質(zhì)的試劑 、好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。

下面就樣本收集跟保存兩點(diǎn)恒遠(yuǎn)生物提幾個(gè)建議:

 1.嚴(yán)重溶血,以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;

2.混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng):

3.標(biāo)本凝固不全 ,有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;

4.采血試管洗滌不徹底 、反復(fù)使用易交叉污染:塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。

    血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測,嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說來,在 5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡;鞚峄蛴谐恋淼难鍢(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使 抗體 效價(jià)跌落,所以測 抗體 的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存;最好使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān);EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性;血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/span>

              

 

 

 

 

       上海滬鼎生物科技有限公司主營:elisa試劑盒銷售、elisa實(shí)驗(yàn)外包、elisa技術(shù)指導(dǎo)、操作指導(dǎo)、elisa試劑盒代做實(shí)驗(yàn)、代做課題等技術(shù)服務(wù)。經(jīng)過多年的磨練以及在實(shí)踐中的認(rèn)識,我們形成了獨(dú)特的市場優(yōu)勢:產(chǎn)品齊全、價(jià)格合理、經(jīng)營穩(wěn)健、信息反饋及時(shí)、保證售前,售中,售后始終如一的提供最用心的服務(wù),新老客戶均可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)。
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