近日，我司技術(shù)部反應(yīng)，有不少客戶(hù)在ELISA試劑盒洗滌步驟中容易出錯(cuò)，從而導(dǎo)致對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員根據(jù)自身多年經(jīng)驗(yàn)分析ELISA洗滌，在這里分享給各位朋友們！希望能夠給您的實(shí)驗(yàn)帶來(lái)幫助。
    洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào)，從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留，在最后一步產(chǎn)生信號(hào)。而不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的結(jié)果。本文將為你介紹一些利用自動(dòng)洗板機(jī)來(lái)洗滌Elisa平板的技巧。
    第二個(gè)影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當(dāng)然，洗滌次數(shù)越多，背景越低。然而，太多次的洗滌會(huì)降低信號(hào)強(qiáng)度，使其難以測(cè)定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過(guò)，Elisa板的制造商會(huì)對(duì)洗滌次數(shù)提出建議。一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶(hù)包被的平板要少。對(duì)于用戶(hù)包被的Elisa板，必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。
    控制洗滌量和洗滌次數(shù)的另一種方法是加入過(guò)量的洗滌液。一般來(lái)說(shuō)，96孔板的每個(gè)孔能容納330至460μl。不過(guò)，有些自動(dòng)化洗板機(jī)可設(shè)置程序，分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個(gè)量的洗滌液，比如1ml。它是如何做到的呢？其實(shí)很簡(jiǎn)單，就是在分液的同時(shí)打開(kāi)吸液功能。換句話(huà)說(shuō)，隨著分液器分配更多的液體，抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗滌量，但不會(huì)溢出到其他孔中。
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