購買ELISA試劑盒時,很多客戶們會比較關(guān)心“質(zhì)量過關(guān)嗎”“壽命長久嗎”“精密度夠要求嗎”等相關(guān)問題.ELISA實驗中為了確定最佳信號和最低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定,包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋,按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作.這些都是一些基礎(chǔ)知識,今天酶聯(lián)免疫學第三方檢測中心帶您一起來看最新ELISA試劑盒操作技術(shù)常識分享：
試劑盒的配制
對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié).在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子.根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶.
一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml.可利用標準的ELISA操作流程 放大試劑盒 第三類試劑 或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度.為了優(yōu)化靈敏度,建議孵育標準品和標本.若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性.
注意事項
1.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
2.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘.
3.保存于2-8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標示.
什么是ELISA試劑盒的回收率？是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準確度.比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20 mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為2.98mg/L,則認為回收率為98%.
對于定量檢測來說,主要還是一個準確度的驗證.不過我看到別人寫的內(nèi)容比我自己想說的要好,所以就貼上去了.相對回收率可能會高于100%的,如果只是說“損失程度”,其實是不準確的.應(yīng)該說,回收率越接近100%,說明這個試劑盒的準確度越高.
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