相信購買過ELISA試劑盒的朋友們都知道試劑盒里面沒有裝備酶標(biāo)儀,但是想要做ELISA實(shí)驗(yàn)酶標(biāo)儀又是必不可少的,那到底酶標(biāo)儀是個(gè)什么東東呢?
酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺變相的專用光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同.是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果.微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程.而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單.
光是電磁波,波長100nm～400nm稱為紫外光,400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光.人們之所以能夠看到色彩,是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回來.綠色植物之所以是綠色,是因?yàn)橹参镂盏拇蟛糠譃榧t橙光和藍(lán)紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色.酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值.
檢測單位
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系.
檢測單位用OD值表示, OD是optical density（光密度）的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=log（1/trans）,其中trans為檢測物的透光值.根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 為在檢測物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度.
