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細胞培養(yǎng)液選配關(guān)注點
發(fā)布時間:2018/12/14 11:24:25 已瀏覽次數(shù): 919 次

  培養(yǎng)液是人工模擬細胞體內(nèi)生長的生存環(huán)境,對于細胞培養(yǎng)起著關(guān)鍵性作用.

1.選擇培養(yǎng)基沒有一定的標準,某種培養(yǎng)基可以適合多種細胞,某種細胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長.但是,建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞首選的培養(yǎng)基.可以查閱參考文獻,或在購買細胞株時咨詢.
 
2.1640的確是非常便宜的培養(yǎng)基,也很好用.但是,它的緩沖力zui弱,所以有時會對細胞的生長狀態(tài)有影響,尤其是一些實驗室長期傳代狀態(tài)不好的細胞.有條件還是用DMEM培養(yǎng)基.
 
3.一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,放入4度冰箱.應該在2到3周內(nèi)用完它.因為,一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解.2-3周后就降解完了.
 
4.培養(yǎng)基的pH值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈拋物線增長,當碳酸氫鈉加到一定量時,pH變化越來越小.而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈直線增長,碳酸氫鈉量越大,滲培養(yǎng)基變成了高滲溶液,細胞會脫水萎suo滴.(ATCC推薦大部分細胞添加碳酸氫鈉為1.5g/L)
 
5.胎牛血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,2~3周就降解了.可將1瓶500ml的血清,每次40~45ml分裝于無菌50ml離心管中.
 
6.血清的解凍和細胞的解凍正相反:細胞是越快越好;血清是越慢越好.血清解凍步驟:-20℃或–70℃冰箱拿出來,放到4℃冰箱,放一天,慢慢融化.
 
7.進口的胎牛血清,一般不需要熱滅活,因為會造成沉淀物顯著增多,且會影響血清的品質(zhì).這些沉淀物在顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常誤以為是血清遭受污染.
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