為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細胞（也就是一層小鼠胚胎成纖維細胞）上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng).但是在這些基質(zhì)上培養(yǎng)干細胞是相當(dāng)昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長時間內(nèi)保持未分化狀態(tài),盡管所有必需的生長因子都存在.

 

      研究團隊正在研究hESC簇分化成神經(jīng)細胞,他們一直在使用Invitrogen的Neurobasal培養(yǎng)基.這種培養(yǎng)基能夠在無滋養(yǎng)層的條件下長時間維持神經(jīng)細胞的生長和正常表型.在研究過程中,研究人員注意到并非所有細胞都分化了.他們懷疑是培養(yǎng)基的選擇導(dǎo)致了這種現(xiàn)象,于是他們開始集中精力研究培養(yǎng)基如何促進干細胞生長并抑制分化.

 

     為了驗證他們的理論,研究小組定制了培養(yǎng)基.他們在Neurobasal培養(yǎng)基中加入了血清替代物,還加入了干細胞生長所需的蛋白,包括細胞外基質(zhì)組分 神經(jīng)營養(yǎng)因子 成纖維細胞生長因子2和活化素A.研究人員在常規(guī)的無血清培養(yǎng)基和定制培養(yǎng)基中培養(yǎng)了hESC.三個星期之后,定制培養(yǎng)基中存在更多的未分化hESC細胞.

 

      使這種新的培養(yǎng)基,研究小組檢驗了三種不同的hESC系.他們利用熒光激活細胞分選（FACS）在7周和20周后分析了培養(yǎng)物,發(fā)現(xiàn)90%的細胞仍維持多能性.這項突破為在計算機化的自動系統(tǒng)中大規(guī)模擴增胚胎干細胞創(chuàng)造了可能性.此外,通過改變培養(yǎng)條件,還可能進一步指導(dǎo)干細胞長成特定的細胞類型,用于研究或病人的移植.