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植物組織培養(yǎng)出現(xiàn)污染了怎么辦?
發(fā)布時(shí)間:2022/9/6 11:33:05 已瀏覽次數(shù): 607 次

 在處理植物組織培養(yǎng)過程中,一不小心會出現(xiàn)各種污染,到底該如何預(yù)防呢?恒遠(yuǎn)生物技術(shù)人員為大家總結(jié),一起來看看吧!


一、污染原因判斷:
1.培養(yǎng)基污染:若污染菌類是零星分散在培養(yǎng)基中,則可確定是人為引起的污染。比如培養(yǎng)基滅菌不徹底,開瓶時(shí)間過長,滅菌后存放時(shí)間過長等; 高溫蒸汽滅菌器的溫度、壓力、時(shí)間沒有正確設(shè)置;過濾滅菌過程中濾膜孔徑選擇、過濾滅菌器的滅菌處理、過濾滅菌操作等均會影響培養(yǎng)基的滅菌效果。措施:嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)要求,滅菌規(guī)程操作。

2.外植體污染:若污染菌類是從材料周圍長起,且發(fā)生在 5 天以后,則說明是材料帶的內(nèi)生菌?赡苁墙臃N用具滅菌不徹底,接種時(shí)材料被污染;若從培養(yǎng)基以下開始長菌,發(fā)生時(shí)間較早,且有從里向外的趨勢,則說明是切口引起的污染,原因可能是未剪去兩個切口或者雖剪去切口但是所用器具帶菌;或者是未及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染苗,接種過程中引起交叉污染;措施:取材時(shí)應(yīng)仔細(xì)選擇,以減少污染的發(fā)生。

3.操作環(huán)節(jié)污染:接種室是否清潔、干燥、密封,是否經(jīng)常用紫外燈照射、甲醛熏蒸、70% 的酒精噴霧殺菌等;超凈工作臺擺放物品雜亂,長時(shí)間不換濾網(wǎng),導(dǎo)致凈化能力降低;接種用具滅菌不徹底引起污染;操作不正確等。

措施:每次接種前半個小時(shí),用 20% 的新潔爾擦洗室內(nèi)設(shè)備、工作臺面,再用紫外燈照射 20 min。還可以噴灑 70% 的乙醇進(jìn)行消毒。除了培養(yǎng)基、接種材料、器具和用具保證無菌外,同時(shí)在接種時(shí)還需要嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作。

二、出現(xiàn)污染后處理措施:
1.真菌污染后,如果已形成孢子,則必須經(jīng)高壓滅菌后扔掉;若使細(xì)菌污染,只要及時(shí)發(fā)現(xiàn),將材料上部未感染菌的部分剪下轉(zhuǎn)接,材料仍可以用。

2.用抗生素等殺菌藥劑的處理。但至今還未發(fā)現(xiàn)哪種抗生素能夠?qū)Ω鞣N菌都有效,并且常常也會影響植物材料的正常生長分化。另一些藥劑,雖有的殺菌效果好,但往往容易引起鹽害,也無法利用。

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