產(chǎn)品名稱	兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒			適用生物	人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、豬(PoFAine)、兔(Rabbit)、雞(Chiken)人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、豬(PoFAine)、兔(Rabbit)、雞(Chiken)..........
產(chǎn)品用途	僅供科研實驗，不用作臨床診斷！！			進口商	上海恒遠生物科技有限公司
品牌商	R&D TSZ(美國)			質(zhì)量認證	ISO9001：2008 ISO13485：2003
檢測范圍	如：1.23-100ug/mL（詳見說明書）			靈敏度	0.54ug/mL（詳見說明書）
樣本類型	Serum, plasma and other biological fluids
實驗時長	2.5h-3h	實驗方法	夾心法/競爭法	樣本收集處理操作信息請聯(lián)系在線客服索取
產(chǎn)品規(guī)格	96T/48T	價格	請咨詢業(yè)務(wù)員	下載	中文版說明書英文版說明書
產(chǎn)品詢問	可將產(chǎn)品相關(guān)問題發(fā)送至我司郵箱，半個工作日回復(fù)！

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中依次加入標本或者標準品、生物素化的抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定OD值，計算樣品濃度。

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標試劑	6ml×1瓶	8	標準品（160μg/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標包被板	12孔×8條	9	標準品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說明書	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

80μg/L	5號標準品	150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
40μg/L	4號標準品	150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
20μg/L	3號標準品	150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
10μg/L	2號標準品	150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
5μg/L	1號標準品	150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒

實驗過程

加樣→ 孵育→ 檢測抗體→ 顯色→ 讀數(shù) →數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)處理及報告

繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應(yīng)OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

客服服務(wù)

1品質(zhì)承諾

公司的核心價值是誠信為本，質(zhì)量第一，我司承諾如產(chǎn)品質(zhì)量有問題，我們會免費更換產(chǎn)品或退款。

2技術(shù)服務(wù)

由從事生命科學研究的高級技術(shù)人才提供技術(shù)支持，務(wù)求協(xié)助廣大科研工作者準確達成目標，共同創(chuàng)造驕人成績。

3配送服務(wù)

我司在總部上海擁有自己的配送隊伍，同時和各大快遞公司建立了深厚的合作關(guān)系，保證產(chǎn)品準時到達。

樣品收集、處理及保存方法

1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒 使用指南

步驟	常見問題	解決方案
實驗準備	1 加樣器不準確；尤其10ul以下的加樣器，對結(jié)果影響極大； 2 保溫設(shè)備不良； 3 洗滌用水不規(guī)范。	1 校正加樣器；10ul以下加樣器好采用進口產(chǎn)品（芬蘭、法國等）； 2 仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳； 3 必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等。 4 認真閱讀使用說明書。
樣品加樣	1 加樣不準確； 2 沒有混勻。	1 加樣時一定要仔細。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。 2 加樣后，反復(fù)抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導致非特異性吸附。
洗滌	洗滌不徹底	1 每次注水洗滌，應(yīng)靜止30秒鐘； 2 選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分； 3 可選用塑料洗滌瓶。
加酶反應(yīng)	漏加	滴加后，認真檢查各孔
試劑保存	保存不規(guī)范	一定要在2-8℃存放。不得過高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。
對照品	對照品為凍干品	按對照管標示，加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶，充分溶解混勻�？砂凑f明書使用。