產(chǎn)品參數(shù)

T4 DNA連接酶參數(shù)

英文名稱：T4 DNA Ligase 

CAS號：9015-85-4

分子量：55.3kDa，單體

級別：    BR

來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌

濃度：30Weiss u/ul(6000CEU/ul）

活性定義：是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中，37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個weiss單位相當(dāng)于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位：20ul反應(yīng)體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量） 

酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]

保存液組分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油

10×T4 DNA Ligase緩沖液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)

抑制劑：當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時，可強烈抑制T4 DNA Ligase活性

失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘

注意：T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉(zhuǎn)化時，連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細胞體積中的10%；電轉(zhuǎn)化之前，先用lvfang抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物

質(zhì)量控制：測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力

性狀：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP

用途：生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù)；連接酶介導(dǎo)的RNA檢測；位點特異性突變；擴增片段長度多態(tài)性

保存： -20°C

公司介紹

上海恒遠生物科技有限公司座落于風(fēng)景秀麗的上海閔行科技工業(yè)園區(qū)內(nèi)，是一家品牌試劑代理商。我司代理進口Elisa試劑盒，生物試劑，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基。公司采用先進的檢驗技術(shù)及設(shè)備、人性化的辦公環(huán)境,讓所有員工在舒適的環(huán)境中工作和生活。公司成立以來，匯聚了一批充滿活力、高效務(wù)實的技術(shù)人才和一支嚴密矩陣的管理隊伍。同時，引進國內(nèi)外的優(yōu)秀企業(yè)的先進技術(shù)，更加促進了公司的進步和提高了為客戶服務(wù)的能力。

安全操作

T4 DNA連接酶操作

1. 實驗室的標(biāo)準(zhǔn)溫度為20℃,一般檢測間及試驗間的溫度應(yīng)在20±5℃， 線值計量標(biāo)準(zhǔn)間為20±2℃，電工與無線電專業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)間和線值計量的計量檢測儀器間為20±3℃。

2. 實驗室內(nèi)的相對濕度一般應(yīng)保持在50－70%。

3. 實驗室的噪音、防震、防塵、防腐蝕、防磁與屏蔽等方面的環(huán)境條件應(yīng)符合在室內(nèi)開展的檢定項目之檢定規(guī)程和計量標(biāo)準(zhǔn)器具及計量檢測儀器設(shè)備對環(huán)境條件的要求，室內(nèi)采光應(yīng)利于檢定工作和計量檢測工作的進行。

化學(xué)試劑純度等級

國外試劑純度級別說明

T4 DNA連接酶說明

Ultra Pure：超純，與GR級相近。

High Purity：高純，與AR級相近。

Biotech：生物技術(shù)級，與BR級相近。

Reagent：試劑級，與CP級相近。

ACS：美國化學(xué)學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)，與AR級相近。

USP：藥用級

公司其他產(chǎn)品溫馨提示

首先要注意有效期，盡量買剛出廠不久的。大家更多的了解試劑盒無非就是擔(dān)心實驗?zāi)芊癯晒�，試劑盒結(jié)果出來以后如何解釋。只要是商品化試劑盒，都是比較穩(wěn)定的，但一般檢測抗原不如檢測抗體準(zhǔn)確度高。