【產品名稱】：小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產品性狀】：96T/48T，盒裝液體
【貯        藏】：2-8°C
【有  效  期】：Elisa試劑盒二年，我公司Elisa試劑盒均為新批次，可放心購買。
【主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。
【標        本】：血清/血漿/細胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物
【質量承諾】：我們堅持對產品質量作不斷的評估、創(chuàng)新和改善以確保您對我們產品的高度信任。
【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等
【樣品采集】：Elisa試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

需要但未提供的材料 
1. 可在450nm處進行讀數(shù)的酶標儀； 2. 能精確吸取10-200µL的移液器； 
3. 可調多道（8）移液器（50－200µL）； 4. 供可調多道移液器使用的試劑存放槽； 5. 洗瓶或洗板機； 6. 蒸餾水或去離子水； 7. 1升的圓柱形量筒； 
8. 移液器：1和（10或25 mL）； 9. 移液器槍頭； 10. 紙巾； 
11. 計時器，用以監(jiān)控溫育步驟； 
12. 處理池和消毒劑（例如：0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水）；  
準備工作： 
1. 濃縮洗滌液(20X)用雙蒸水稀釋成1X(至 500ml)。  
小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒操作步驟： 
試劑盒應平衡至室溫（20-25°C ）再試驗。     取出所需反應板。 
1. 加入10ul標準品(Standards)、10ul標本于相應反應板孔中。 
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。輕輕混勻30秒，封
住板孔，室溫溫育 45分鐘。 
3. 洗板：甩盡板內液體，用洗滌液洗滌反應板（每孔內加入350ul洗滌液），并去除水滴
（在厚疊吸水紙上拍干）；反復洗滌5次。 
4. 每孔加入100ul顯色液， 輕輕混勻10秒，室溫溫育20分鐘。 
5. 每孔加入100ul終止液（Stop Solution）。輕輕混勻30秒；30分鐘內在450nm處讀OD
值。  
以OD值為縱坐標，以標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線。根據樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度。

實驗中可能出現(xiàn)問題       

一、所有孔未顯色？

分析原因：      

1、微孔加入抗體后，洗板不徹底，微孔中存在游離的抗體。          

2、用錯試劑。          

3、在操作中忘記加酶或抗體。     

 解決辦法：            

1、檢查洗板器械，比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。          

2、在加樣前，要看清瓶簽。          

3、嚴格按說明書操作步驟進行實驗，確保每步都到位。          

二、所有孔顯色偏低？

分析原因：    

1、微孔加入抗體后，洗板不徹底，微孔中存在游離的抗體。          

2、洗板不干凈。          

3、抗體污染了酶結合物等其它試劑。          

4、溫度沒達到要求。          

5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。      

解決辦法：     

1、手工加蒸餾水洗板時，要避免吸頭接觸微孔，常更換新的蒸餾水。    

2、洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水（約400ul），且至少洗板五次。      

3、嚴格按說明書要求操作，每次取樣要更換吸頭。      

4、控制孵育溫度在25℃。       

5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足，加樣時務必將吸頭內液體打盡。 

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